【1001问】问题293:黑色素染色都有哪些方法？各有何特点？

2023-05-31

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黑色素染色都有哪些方法？各有何特点？
在某些病理情况下，例如由于黑色素细胞的增生或功能亢进等原因所引起良性或恶性的病变，种类较多。单用一般常规HE染色，黑色素颗粒不能显示，这给病理诊断带来一定困难。因此必须选择特异性强、操作较为方便和效果好的染色方法。黑色素染色方法很多，如多巴氧化酶法、硫酸亚铁吸收法、亚铁氰化钾法和银浸染色法等，它们各有自身的特点和运用途径。这里把由董妙珠等对这些染色法的分析研究给大家做个介绍，以供参考应用。
1.染色原理：
（1）多巴氧化酶法：多巴氧化酶又称酪氨酸酶，催化酪氨酸氧化为多巴 （3，4-二羟基苯丙氨酸），并通过各种中间产物氧化多巴成黑色素。多巴氧化酶参与各种黑色素的形成过程。
在一般情况下，该酶见于表皮的黑色素细胞，某些神经节细胞和黑色素瘤中，如有此酶存在，表明这种细胞能产生黑色素。在活体皮肤组织内，只有一种多巴阳性细胞，这种细胞就位于表皮基底细胞之间的树突细胞或称黑色素细胞。在正常情况下表皮基底层内黑色素细胞排列有一定规则即在基底层细胞之间，数量也是一定的。只有病变时黑色素才会增加或减少。当基底层细胞液化或变性，黑色素也可能脱落，被吞噬细胞吞噬，也有黑色素细胞突内的细小颗粒被邻近的表皮细胞和真皮细胞的巨噬细胞通过胞饮作用所摄取，使这些细胞质出现粗大的颗粒，这些细胞称为黑色素载运细胞，后者不会有氧化酶，不能产生黑色素。
（2）硫酸亚铁吸收法：
是一种亚铁离子的吸附法，黑色素能摄取亚铁离子，即把亚铁离子吸附在黑色素上，形成黑色素亚铁复合物，其后铁氰化钾与亚铁离子结合在酸性环境下生成铁氰化亚铁，即藤氏反应。
（3）亚铁氰化钾法：
是因为黑色素细胞均含有高价铁，即高价铁与亚铁氰化钾作用生成亚铁氰化铁（普鲁士蓝反应）。
（4）银浸染色法：
是因为黑色素具有还原性，能将氢氧化银氨液内的银离子还原成金属银而成黑色。先用硝酸银与氢氧化氨作用生成氨氧化银铵的化合物。黑色素把银氨化合物还原成黑色的金属银。
（5）亚铁氰化钾法：
黑色素细胞呈蓝黑色，胶原纤维和表皮角质层呈蓝色，嗜银颗粒细胞、嗜铬颗粒细胞、脂褐素均为蓝黑色。
（6）银浸染色法：
黑色素细胞呈黑色，胶原纤维呈红色，表皮角质层呈深红色，嗜银颗粒细胞、嗜铬颗粒细胞、脂褐素均为黑色。
2.结果判定：
（1）多巴氧化酶法：
黑色素细胞呈黑色，胶原纤维和表皮角质层呈红色，嗜银颗粒细胞、嗜铬颗粒细胞、脂褐素均无色。
（2）硫酸亚铁吸收法：
黑色素细胞呈暗绿色，胶原纤维和表皮角质层呈淡蓝色，嗜银颗粒细胞、嗜铬颗粒细胞、脂褐素均为暗绿色。
可以看出4种染色方法，只有多巴氧化酶法，黑色素细胞为黑色，其他组织为红色，充分说明它的特异性。因为黑色素细胞是一种合成和分泌黑色素的树突细胞，属外胚层神经源性细胞，多存在于表皮基底层和毛发中。在HE染色切片中细胞质透亮，核深，故又称为亮细胞。由于不能看到其全貌，故常用多巴氧化酶法染色可显示。这是由于黑色素细胞内有酪氨酸酶 （多巴氧化酶能将酪氨酸转变成黑色素的缘故，是一个完整的生物化学反应。其他3种染色方法利用化学的氧化还原法和吸附法使黑色素产生反应，由于所用的方法不同，黑色素细胞出现不同的颜色，其共同的特点黑色素细胞、嗜银颗粒细胞、嗜铬颗粒细胞、脂褐素等细胞和色素细胞不能区分，只能说黑色素细胞存在，没有特异性。


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