【1001问】问题292:荧光法显示淀粉样物质什么方法最佳？

2023-05-30

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荧光法显示淀粉样物质什么方法最佳？
国外文献提到硫代黄素T对淀粉样物质的染色具有特异性。四种浓度硫代黄素T在荧光显微镜下均能对真皮乳头层无定形、淀粉样物质显示出强亮绿色荧光，但1%、0.5%的浓度对其他组织和细胞也能显示不同程度的非特异性亮绿色荧光，特别是1%浓度，对真皮乳头层散在的、较小的颗粒状淀粉样物质细胞不易区分；0.05%的浓度对无定形淀粉样物质染色较浅，颜色不清晰，色泽较暗；而0.1%浓度时非特异性荧光表现为非常微弱，且形态及结构均与颗状淀粉样物质完全不同，具有阳性率高、非特异性小、制作方便快捷等优点，实为一种对淀粉样物质有特异性敏感的方法之一，现就把由李斌等引进并率先应用的方法介绍给大家：
1.操作方法：
（1） 石蜡切片 （4μm），常规脱蜡至水洗。
（2）蒸馏水洗二次，共5分钟。
（3）PBS缓冲液浸洗2次，共5分钟。
（4）分别滴加0.1%硫代黄素T水溶液染色20分钟。
（5）PBS缓冲液浸洗3次，最后一次浸至无黄色析出为止，每次3～5分钟。
（6）风干后用缓冲甘油封片。
2.结果判定：
硫代黄素T溶液在真皮乳头层见到强亮绿色无定形样物质荧光，而在表皮细胞、真皮层、血管等处的炎症细胞及正常皮肤部位仅见微弱的非特异性亮绿色荧光，且能与无定形淀粉样物质的形态区分出来。


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