【1001问】问题295:Masson-Fontana银染法是显示黑色素的最常用方法，有没有缩短染色时间的快速染法？

2023-06-02

图片

Masson-Fontana银染法是显示黑色素的最常用方法，但这种方法染色时间长（12小时）、易脱片，常贻误诊断，有没有缩短染色时间的快速染法？
Masson-Fontana银染法是一种显示黑色素的常用方法，但由于染色时间长 （12小时）、易脱片，常贻误诊断，笔者了解一种改良的Masson-Fontana银染法，只需10分钟，就可完成染色，且黑色素颗粒清晰，无背景着色，效果很好，现介绍给大家：
1.组织处理：
标本由甲醛溶液固定液固定，常规脱水、石蜡包埋、切片3～4μm。
2.试剂制备：
氨银液的配制：取5%硝酸银水溶液40ml，逐滴加入浓氨水至产生棕黑色沉淀，再继续缓慢地逐滴加入浓氨水，边加边振荡，当沉淀几乎接近溶解，仅有少量微粒即可。
3.染色方法：
（1）常规石蜡切片脱蜡至水洗，蒸馏水洗3～5分钟。
（2）切片放入盛有40ml氨银液的50ml洁净玻璃染色缸内，然后把染色缸放入微波炉内，将微波强度调中挡，微波辐射1分钟，其氨银液温度分别为65～70℃。
（3）切片从微波炉内取出，蒸馏水洗1分钟。
（4）0.2%氯化金调色1～2分钟，蒸馏水洗1分钟。
（5）5%硫酸钠固定1～2分钟，流水冲洗1分钟。
（6）0.1%核固红染细胞核4分钟，水洗。
（7）95%乙醇脱水至封片。
4.结果判断：
在浅红色背景下有明显的黑色素颗粒着色。
5.此法特点：
采用微波辐射染色法，因微波辐射可加快分子运动及改变大分子的空间结构，有利于硝酸银的渗入和结合，因而缩短了染色时间且染色效果好，保证了及时诊断和治疗。用微波辐射染色，应严格掌握微波辐射时间和微波强度，实验证明，辐射时间过短，起不到染色效果，辐射时间过长或散波强度过大，组织在沸腾染液中会出现过染，即全部组织着色和沉渣样黑色沉淀附着切片现象，以中挡微波强度，微波辐射1分钟的效果最好。


share