【1001问】问题297:冰冻切片需要快速诊断，是否有冰冻切片的黑色素快速染法吗？

广州秀威贸易有限公司
2023-06-07

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冰冻切片需要快速诊断，是否有冰冻切片的黑色素快速染法吗？
在恶性黑色素瘤的冷冻切片中，仅靠形态学诊断非常困难，对冷冻切片上黑色素形成不明显、黑色素颗粒细小、散在或棕色颗粒难与含铁血黄素相鉴别时尤为困难，如采用常规的Masson-Fontana染色，可有一定的帮助，但该染色需要时间长（12小时）不能用于快速冷冻切片的诊断。现给大家介绍一种由范慧等率先创立采用的快速黑色素染色法，全部过程仅需11分钟，可取得满意效果。
1.操作方法：
（1） 冷冻切片厚5μm。
（2）80%乙醇固定20秒，水洗0.5分钟。
（3）蒸馏水洗0.5分钟。
（4）切片放入盛有40ml氨银液 （取5%硝酸银水溶液40ml，逐滴加入浓氨水至产生棕黑色沉淀，再继续缓慢地逐滴加入浓氨水，边加边振荡，当沉淀几乎接近溶解，仅有少量微粒即可）的50ml洁净玻璃染色缸内，然后把染色缸放入微波炉内，将微波强度调至中挡 （65～70℃）微波辐射1分钟。
（5）把切片从微波炉内取出，蒸馏水洗1分钟。
（6）0.2%氯化金调色1～2分钟。
（7）蒸馏水洗1分钟。
（8）5%硫酸钠固定1～2分钟。
（9）流水冲洗1分钟。
（10）0.1%核固红染细胞核4分钟。
（11）水洗，95%乙醇脱水至封固。
2.结果判定：
冷冻切片在浅红色背景下有明显的黑色素颗粒着色。


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