含蜡组织块脱水不足如何补救?

2021-12-29

含蜡组织块脱水不足是指处理病理标本时组织块脱水不尽而被浸蜡甚至包埋,以致石蜡不能完全浸透组织,失去应有的支持作用。此常见于全自动组织脱水机的组织处理过程,因其是无人值守操作,所以一旦发现脱水不足.组织块往往已经浸蜡。考虑到再取材工作量巨大,加之内镜,穿刺等标本再取材困难,对组织进行补救处理显得尤为必要。组织脱水不足常影响后继的透明与浸蜡,表现为含蜡组织块发软,制成蜡块后组织块与周边石蜡容易发生脱离,此种蜡块往往难以切出组织薄片或即使强行切出也会出现组织挤压、破碎,影响病理诊断:对上述含蜡组织块进行补救性处理,是个很棘手的问题,实践证明将此类组织块用二甲苯多次脱蜡后,入逆梯度乙醇直至水化,再重新脱水,实际效果甚微。下面就介绍一种方法,可基本解决这一问题。

操作方法

(1)将全自动脱水机或手工处理后有明显脱水不足现象的已浸蜡样本蜡块放入60℃石蜡溶液中, 使组织周围石蜡完全溶解,保持组织块内石蜡成分处于溶融状态。同时,在75℃水浴槽内先后放人盛有30ml丙酮的烧杯A (50ml容积),加热丙酮(隔段时间再加热盛有30ml丙酮的烧杯B)。
(2) 待丙酮A完全沸时,放人组织块,此时丙酮内逐渐有白色糊状石蜡沉淀出现,组织块有液泡冒出。
(3) 当丙酮B完全沸时,迅速将组织块从A丙酮换入其中,处理10分钟,此时丙酮内石蜡沉淀明显减少,组织块仅有少量或无液泡冒出。
(4) 取出组织块,立即投人75℃石蜡溶液中,直至组织块尤气泡冒出,约15分钟。
(5) 常规包埋、切片、HE染色。

效果

经此法处理,组织块硬度有所增加,所制备蜡块容易切出薄片,组织无挤压,HE染色颜色艳丽,结构清楚。

本法的理论基础

(1)丙酮和石蜡不相溶,此特性保证了彼此单向置换,即以丙酮为溶液时,石蜡被置出;以石蜡为溶液时,丙酮被置出。
(2)以75℃作为脱蜡与浸蜡的适宜温度,远高于丙酮沸点(56~57℃)及石蜡溶点(58~60℃), 能使丙酮与石蜡有效而快速地进行单向置换。
(3)丙酮作为一种快速脱水剂,目前主要用于快速石蜡切片的制备,适宜温度亦为75℃。

注意事项

(1)对已包埋的蜡块,应事先融溶.
(2)组织块投入A、B丙酮时,应及时迅速,以防石蜡凝结导致置换失败。
(3)A、B丙酮放入水浴槽的时间差实为A丙酮的处理时间。实际操作中,可视组织块体积大小或数量多少酌情调整A、B丙酮处理时间。


分享