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第5版WHO乳腺肿瘤分类(以下简称第5版分类)将乳腺腺泡细胞癌、腺样囊性癌、分泌性癌、黏液表皮样癌、多形性腺癌、伴有极性反转的高细胞癌纳入乳腺少见和涎腺型肿瘤章节[1]。正常乳腺和涎腺均为小管腺,具有
2023-04-27
皂化技术在黏液染色中有何作用,如何操作?
在常规黏液组织化学染色中,均采用PAS染色法。在应用过程中,发现此法着色过浅,显色不清晰,长期用甲醛固定的组织可能因甲醛聚合作用。而对PAS的染色反应强度下降。如对染色前的组织切片经氢氧化钾皂化处理后,能明显提高黏液的染色性。现将此法介绍如下:
1.操作方法:
(1)切片常规脱蜡至蒸馏水。
(2)将切片移至70%乙醇。
(3)切片用0.5%氢氧化钾 (70%乙醇配制)室温下皂化处理30分钟。
(4)将切片细心地在70%乙醇内慢洗。
(5)在缓慢流水内冲洗10分钟。
(6)1%过碘酸氧化10分钟,蒸馏水洗。
(7) 入Schiff液染色30分钟。
(8) 流水洗10分钟。
(9)逐级乙醇脱水,二甲苯透明,树胶封固。
2.结果判定:
经氢氧化钾皂化后的切片PAS反应性明显增强;特别是长期固定于甲醛内的组织由于甲醛的聚合作用使PAS的反应性下降,经氢氯化钾皂化后使黏液嗜碱性增强,使黏液和染色剂力增强,故颜色明显加深,只有这样才能真正反映出组织内黏液的实际含量。
3.注意事项:
(1)组织经皂化后,在染色过程中有时容易掉片,故推荐捞片时使用0.1%明矾溶于1%明胶液黏着剂处理的切片。
(2)染色过程中,过碘酸氧化时间限制到10分钟,氧化时环境温度不能超过20℃,过碘酸溶液的pH应为3.0~5.0。4.此法优势:操作简便,结果可靠,可适用于常规黏液染色,特别是长期甲醛固定的组织效果更佳。
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