广州市秀威贸易有限公司

【1001问】问题275:有没有一种能在同一张切片中同时显示硫酸化酸性黏液、非硫酸化酸性黏液及中性黏液的黏液染色法？

2023-05-04

有没有一种能在同一张切片中同时显示硫酸化酸性黏液、非硫酸化酸性黏液及中性黏液的黏液染色法？

黏液染色是胃肠道疾病诊断和研究中最主要的手段之一。目前现有的黏液染色，其每一方法只能显示一种或者最多同时显示两种不同性质黏液，这常常给诊断或研究工作带来诸多不便。因为三种不同性质黏液常常是同时存在于某一组织中。在胃肠道疾病的研究中，深感过去几种黏液染色方法在方法学上的缺陷，并试图寻找一种在一张切片上可同时显示三种不同性质黏液，并有利于黏液的定位、定性、定量的黏液染色方法。硫酸黏液、非硫酸黏液及中性黏液的套染可解决过去黏液染色法存在的不足。利用不同性质黏液可呈现不同颜色反应原理，使之互不干扰地呈现在同一张切片上。因而提出一种HID-AB（pH 2.5）-PAS黏液套染法。在此方法中，硫酸化黏液呈现棕黑色，非硫酸化黏液呈现蓝色，而中性黏液呈现红色，一目了然，对比分明。与过去黏液染色法相比，HID-AB（pH 2.5）-PAS黏液套染法对在同一张切片中的三种不同性质黏液的分布及数量的观察非常直观、方便，尤其对胃黏膜肠上皮化生的类型及胃癌组织发生学分类的识别极为便捷。现介绍如下：

1.染液制备：

（1）高铁二胺成套原染液：N-N二甲基-间-次苯基二胺盐酸120mg+N-N二甲基-对-次苯基二胺盐酸盐20mg+62%FeCl3-6H2O 1.4ml。将两种二胺盐混合于50ml双蒸水中彻底溶解，再加入1.4ml 62%的FeCl3-6H2O充分混匀，调pH为1.5～1.6之间。此液应在临用前新鲜配制。

（2）1%阿新蓝液：阿新蓝（8GX）1g溶于3%乙酸100ml中，调pH为2.5。临用前新鲜配制，过滤使用。

（3）PAS染液：1%过滤碘酸水溶液、Schiff液（碱性品红1g+偏重亚硫酸钠3g+1mol/L盐酸30ml+双蒸水170ml；活性炭2g）。

（4）将碱性品红溶于煮沸的双蒸水中搅拌降温。

2.染色步骤：

（1）切片常规脱蜡入水，双蒸水洗。

（2）切片入高铁二胺染液，在室温下作用16～18小时，双蒸水洗。

（3）3%冰醋酸液洗1分钟×2次。

（4）1%阿新蓝液染10～15分钟（37℃），双蒸水冲洗。

（5）入1%过碘酸水溶液，在37℃下氧化5～10分钟，流水冲洗，双蒸水洗。

（6） Schiff试剂中作用10分钟（37℃）。

（7）用0.5%偏重亚硫酸钠滴洗1分钟×2次，流水冲洗。

（8）1%阿新蓝液（pH 2.5）复染10分钟（37℃）。