【1001问】问题276:有没有一种能显示DNA与黏液物质的双重组合染色法？

2023-05-05

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有没有一种能显示DNA与黏液物质的双重组合染色法？
要想能够在肿瘤组织中，同时可靠的证明DNA、黏液及血液存在的情况，进一步适应诊断和图像分析系统对DNA原位定量分析研究需要，需要建立一种新的省时高效的染色方法。下面就介绍一种这样的方法给大家：
1.组织处理：
组织经中性甲醛固定的石蜡切片。
2.试剂制备：
（1）Schiff液：碱性复红1.5g+1mol/L盐酸20ml+重亚硫酸钠1.5g+蒸馏水200ml。先将蒸馏水煮沸后加入碱性复红，再煮沸1分钟，冷却至50℃后盛入棕色试剂瓶中，加入盐酸，待35℃时加入重亚硫酸钠，置冰箱内备用。
（2）阿新蓝醋酸液：1g+蒸馏水97ml+冰醋酸3ml。
（3）马休黄液：马休黄0.2g+95%乙醇98ml。
3.染色程序：
（1）石蜡切片厚4μm脱蜡至水洗。
（2）用7mol/L盐酸水解10分钟，蒸馏水洗2次。
（3）入Schiff工作液中20分钟。直接浸入自来水中洗。
（4）转入35℃温水中3分钟，蒸馏水洗。
（5）阿新蓝醋酸液中10分钟，蒸馏水2次。
（6）入95%乙醇浸2次。
（7）在马休黄对比液中1分钟。
（8）直接用无水乙醇洗2次。
（9） 用二甲苯-苯酚 （3︰1） 处理。
（10）甲苯透明，中性树胶封固。
4.结果判定：
DNA呈红色，黏液物质呈绿蓝色，红细胞呈黄色，结缔组织无色。

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